產(chǎn)品名稱：碧云天總SOD活性檢測(cè)試劑盒(S0101S)現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品貨號(hào)：S0101S

產(chǎn)品品牌：碧云天

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

碧云天總SOD活性檢測(cè)試劑盒是一種基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過比色來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物陰離子發(fā)生歧化作用，生成過氧化氫(H2O2)和氧氣(O2)，是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。本試劑盒的性能優(yōu)于同類產(chǎn)品總SOD活性檢測(cè)試劑盒(NBT法)。本產(chǎn)品的用途與同類產(chǎn)品總SOD活性檢測(cè)試劑盒(NBT法)相同，等量SOD導(dǎo)致的吸光度變化值顯著大于NBT法，線性范圍更寬。本試劑盒提供的SOD樣品制備液能直接裂解細(xì)胞，無(wú)需勻漿，操作更加便捷。

樣品的準(zhǔn)備：

1. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：對(duì)于貼壁細(xì)胞，吸凈細(xì)胞培養(yǎng)液，用4℃或冰浴預(yù)冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍，按照每100萬(wàn)細(xì)胞加入100-200微升的比例加入本試劑盒提供的SOD樣品制備液，適當(dāng)吹打以充分裂解細(xì)胞；對(duì)于懸浮細(xì)胞，600g離心5分鐘收集細(xì)胞，用4℃或冰浴預(yù)冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍，按照每100萬(wàn)細(xì)胞加入100-200微升的比例加入SOD樣品制備液，適當(dāng)吹打，以充分裂解細(xì)胞。4℃約12,000g離心3-5分鐘，取上清作為待測(cè)樣品。

2. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl，含有0.16mg/ml肝素鈉)灌流清除血液后獲取組織樣品。取適量的組織樣品，按照每10mg組織加入100微升SOD樣品制備液的比例在4℃或冰浴進(jìn)行勻漿(可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器)。4℃約12,000g離心3-5分鐘，取上清作為待測(cè)樣品。

3. 血漿或紅細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：用抗凝管收集血液，顛倒混勻。4℃600g離心10分鐘，移取上清至另一新的1ml離心管中，適量生理鹽水稀釋后即可作為血漿樣本進(jìn)行檢測(cè)。紅細(xì)胞樣品可以參考步驟1a懸浮細(xì)胞樣品的制備方法，或其它不含Triton X-100等去垢劑的樣品制備方法。

4. 上述樣品準(zhǔn)備完畢后測(cè)定蛋白濃度。通常10-20μg蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中的SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考)。每種樣品準(zhǔn)備20-100μg蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

5. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用本試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟組織10%勻漿液(組織和勻漿液的重量比為1:10)上清，通常需要稀釋10-100倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測(cè)定，可以-70℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

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